TERAPIA GENICA Y EL PULMON

Los Neumocitos tipo II son células pulmonares epiteliales de forma cuboide cuya función es la síntesis, almacenamiento y secreción de surfactante para reducir la tensión superficial evitando el colapso del pulmón, además de ser responsables de la renovación del tj. pulmonar al diferenciarse en neumocitos tipo I reestructurando la superficie alveolar.

Se han realizado estudios en estas células siendo modificadas genéticamente para la sobreproducción de proteínas de surfactante así como de factor de crecimiento de los queratiocitos, permitiendo la disminución de la fibrogenesis del pulmón y la reepiteizacion del mismo. Introduciendo una solución salina con estas células y fármacos que ayuden a la terapia antifibrinolitica, permitiendo la recuperación tisular pulmonar.

Uso de neumocitos de tipo II en el tratamiento de enfermedades pulmonares asociadas con fibrosis pulmonar

  

STEM CELLS Y LA NEUMONÍA

En 2010 se produjo un pulmón artificial de ratas que fue trasplantado a otros animales, para obtener la matriz necesaria se trato pulmones de ratas con un detergente hasta la descelularizacion y la matriz obtenida mantenía la estructura de as vías respiratorias y vasculares. Esta matriz se relleno con células neonatales epiteliales y endoteliales para ser incubado en un biorreactor

Para facilitar la trasferencia del tejido pulmonar producido, se utiliza epitelio pulmonar autologo a partir de células troncales o de células iPS.

  

PRODUCCIÓN DE ÓRGANOS BIOARTIFICIALES

RATONES TRANSGÉNICOS Y LA NEUMONÍA

Un equipo de científicos españoles, dirigido por Luís Enjuanes, del Centro Nacional de Biotecnología (CNB-CSIC) de Madrid, ha desarrollado ratones transgénicos que permitirán estudiar los efectos de los distintos agentes infectivos como aquellos que invaden  las mucosas respiratorias o entéricas, Los datos que se obtienen de estas investigaciones se aplican a la ingeniería de vectores virales para la producción de vacunas para terapia génica.

Investigadores españoles crean un ratón transgénico para estudiar la neumonía

Recombinación de Ácidos Nucleicos

RECOMBINACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS EN LA NATURALEZA

Se produce durante la conjugación en las bacterias y algas, durante la traducción o la recombinación meiótica; permitiendo la adquisición o combinación de caracteres que confieren a la descendencia ventajas adaptativas o propiedades de interés. 

             


RECOMBINACIÓN DEL DNA EN STAPHYLOCOCCUS AUREUS

Esta estrategia le permite ser resistente a la Vancomicina, el último medicamento utilizado para su tratamiento, esta resistencia la adquirió durante una infección mixta por el Enterococcus faecalis cuyo gen de resistencia se hallaba en el transposon  (TN1546) localizado en un plásmido conjugativo. El plásmido pudo trasferirse durante una conjugación entre las dos bacterias, o durante la transducción después de la lisis de E. faecalis y sufriese una trasformación por la introducción del nuevo DNA con una recombinación e integración del plásmido de multiresistencia.

Biotecnología alimentaria
Microbiolgía Médica

Estudio del contenido genético del S. aureus mediante Microarrays

La técnica de Microarray permite estudiar el contenido genético de las cepas de S. aureus, portadoras de la LPV, y cepas que no contenían el gen que codifica la toxina LPV. 

Permitiendo la detección de los genes que codifican marcadores de especie, determinantes de resistencia, exotoxinas y superantígenos, proteínas de adhesión, tipos capsulares y genes reguladores como los distintos tipos de agr. Por otra parte, esta técnica también permite determinar el tipo de SCCmec, y en un elevado número de cepas el complejo clonal al que pertenece la cepa estudiada.

 Pasos para la realización de la técnica de microarrays

1. Amplificación: el ADN se amplifica mediante una PCR lineal y se marca con biotina.
2. Hibridación: el ADN producto de la PCR hibrida con las sondas del microarray.
3. Detección: mediante un conjugado de estreptavidina peroxidasa se puede visualizar el precipitado producto de la hibridación. El lector ArrayMate permite capturar y visualizar la imagen del array. La presencia de círculos negros indica que ha habido hibridación.
4. Análisis: el software del ArrayMate mide la intensidad de la señal de cada sonda y determina que genes están presentes en la muestra

STAPHYLOCOCCUS AUREUS EN POBLACIÓN PEDIÁTRICA: EPIDEMIOLOGÍA MOLECULAR Y FACTORES DE VIRULENCIA

Técnicas de PCR para la detección de los genes: gen mecA y gen LPV, responsables de la virulencia del Staphylococcus aureus

Título del Artículo: Portación nasal de Staphylococcus aureus en individuos de la comunidad: factores epidemiológicos.

Objetivo: conocer la situación epidemiológica de una comunidad, que asiste al Centro de Atención Primaria de la Salud y que corresponde a la localidad de Sa. Pereira ubicada a 60 km al oeste de la ciudad de Santa Fe - Argentina, determinar la prevalencia de portadores nasales de S. aureus y sus respectivos patrones de resistencia antimicrobiana, estudiar por técnicas de Biología Molecular (PCR) las cepas SAMR aisladas, para confirmar su resistencia a meticilina, con la detección de gen mec A y presencia de gen pvl, que codifica el factor de virulencia leucocidina de Panton y Valentine y analizar la asociación de SAMR con factores de riesgo y patologías.

Muestra: hisopado de fosas nasales

Extracción del ácido nucléico: DNA cromosómico bacteriano

Pasos para la extracción

• Lisis: ebullición 15min.
• Separación: centrifugación 5min.
• Purificación: se utiliza el sobrenadante como templado.

Gen amplificador:

• gen mecA
• gen pvl
• gen 16S rRNA

Tipo de PCR: 

PCR múltiplex

                                                Temperatura                           Tiempo

• Desnaturalización:         94ºC                                      30seg
• Hibridación:                     52ºC                                     30seg
• Extensión:                         72ºC                                     30seg

Ciclos: 30 ciclos

Visualización: Electroforesis

Portación nasal de Staphylococcus aureus en individuos de la comunidad: factores epidemiológicos

Mecanismos moleculares de la Neumonía provocada por Streptococcus pneumoniae

Pruebas de Screening y Confirmatorias

PRUEBAS DE SCREENING O DE TAMIZAJE

Este tipo de pruebas determina el padecimiento de Neumonía, pero no nos permite conocer a cerca del agente causal definitivo de la misma. Dentro de los exámenes realizados se recurre a una RADIOGRAFÍA DE TÓRAX, pues los síntomas que se presenta son: tos productiva, fiebre y dolor pleurítico.

Esta prueba presenta infiltrados pulmonares con tres patrones según el patógeno responsable:

• Neumonía típica: se asocia a infección por neumoncoco, Haemophylus influenzae, S. aureus y Klebsiella pneumoniae. El cuadro clínico presenta un inicio brusco, con fiebre y esputo purulento, con dolor torácico.
• Neuomía atípica: producida por virus y algunas bacterias como Mycoplasma pneumoniae, Chlamydia spp, Coxiella burnetti.  Los síntomas aparecen progresivamente, hay tos seca, cefalea y astenia.
• Neuomnía mixta: por Legionella pneumonphila, existencia de tos seca, astenia y síntomas abdominales, la clínica evoluciona y hay presencia de fiebre alta, disnea, dolor pleurítico y afectación neurológica.

PRUEBAS CONFIRMATORIAS

Permiten conocer definitivamente al agente causal de la neumonía, se procede a realizar un HISOPADO DE LAS FOSAS NASALES, el procedimiento es el siguiente:

• Se toma muestras nasales utilizando hisopos de algodón estériles. El hisopo se rota dentro de las fosas nasales, tres veces en sentido de las agujas del reloj y tres veces en sentido contrario. Luego se colocó en medio de transporte de Stuart, conservando en hielo (4 °C) hasta su traslado al laboratorio. 
• Se inocula en placas de agar manitol salado y se incubaron a 35 °C por 48 h. Las colonias manitolsal positivas se subcultivaron en agar nutritivo a 35 °C por 24-48 h, al término de las cuales se realizaron extendidos que fueron coloreados con Gram. 
• A aquellas colonias que presentaron morfología microscópica de cocos grampositivos, se les realizó prueba de catalasa y coagulasa en tubo. 
• Se completó la identificación de S. aureus con: prueba de crecimiento en anaerobiosis, Voges Proskauer, sensibilidad a novobiocina, fosfatasa alcalina, ureasa, ácido (en aerobiosis) a partir de trehalosa y manosa y ornitina descarboxilasa.

 

Portación nasal de Staphylococcus aureus en individuos de la comunidad: factores epidemiológicos

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Alteraciones en la traducción de la proteina PVL del S. aureus

La proteína PVL es una leucocidina formadora de poros, esta codificada en dos genes : lukS y luckF, los cuales se ubican en un fago móvil y este al ser inducidos por otra proteína, la Hemolisina gamma traducen mayor cantidad de PVL. El aumento de las PVL conduce a un mayor daño a las celulas incluidos los eritrocitos, neutrófilos y macrofagos, las cuales terminan haciendo lisis lo cual lleva a una neumonía hemorragica severa.

Características generales del Staphylococcus aureus

Resistencia a los antibióticos del Staphylococcus aureus producto de una alteración en la transcripción de proteínas de membrana

Desde su descubrimiento esta bacteria ha sido capaz de mutar y adquirir resistencia a varios medicamentos. En las últimas décadas se ha tratado al Staphylococcus aureus mediante la Vancomicina, pero este ha adquirido resistencia a la misma pues en una infección mixta con Enterococcus faeccalis, poseedor del gen de la resistencia en el transposón TN1546 de un plásmido, se produjo una trasferencia del plásmido. DNA del S.aureus se convinó con este plámido y sufrió una trasformación para así ser capaz de trascribir una nueva enzima B-lactamasa que inhibe a la vancomicina.

Infecciones producidas por Staphylococcus aureus

Factores de riesgo

La bacteria Staphylococcus aureus es la causante de la Neumonía Necrotizante o Adquirida en la comunidad, considerandose un patógeno nosocomial que coloniza la piel, e induce su autoinoculación en la cavidad nasal. Induce una respuesta inmunitaria que estimula la producción de anticuerpos, dando lugar a síntomas alérgicos. Si el paciente entra en un periodo de inmunodeficiencia, la bacteria se activara y producirá infecciones al diseminarse por el organismo con mayor facilidad llegando así a los pulmones. 

Portación nasal de Staphylococcus aureus en individuos de la comunidad: factores epidemiológicos

Staphylococcus aureus y sus genes patogénicos

La Neumonía puede ser causada por diversos microorganismos, dentro de los cuales encontramos al Staphylococcus aureus, responsable de la Neumonía necrotizante adquirida. 
Esta bacteria presenta varios genes responsables de su virulencia como el gen clfA productor de las proteinas ClfA y CLfB encargadas de aglutinar y unir las bacterias al fibrinógeno, o el gen hcla formador de la enzima α-hemolisina formadora de poros en las células del sistema inmunológico para su lisis; entre otros. Ademas se encuentra el el gen mecA responsable de su resistencia a la meticilina (fármaco) y de su fácil propagación.

Patogenia Molecular del Staphylococcus aureus

Neumonía, definición:

La neumonía es un tipo de infección respiratoria aguda que afecta a los pulmones. Éstos están formados por pequeños sacos, llamados alvéolos, que en las personas sanas se llenan de aire al respirar; mientras que en enfermos de neumonía están llenos de pus y líquido, lo que hace dolorosa la respiración y limita la absorción de oxígeno.

http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs331/es/.

Bienvenidos a Mi Blog

Este nuevo blog se lo dedico a mi madre, quien padeció esta enfermedad y la superó, siendo ella mi más grande ejemplo de vida a seguir.